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              環球觀點:流式細胞儀原理是什么?流式細胞儀怎么操作?

              來源:京華在線網 時間:2023-06-25 13:58:43

              流式細胞儀原理是什么?

              流式細胞儀可同時進行多參數測量,信息主要來自特異熒光信號及非熒光散射信號。測量是在測量區進行的,所謂測量區就是照射激光束和噴出噴孔的液流束垂直相交點。液流中央的單個細胞通過測量區時,受到激光照射會向立體角為2π的整個空間散射光線,散射光的波長和入射光的波長相同。散射光的強度及其空間分布與細胞的大小、形態、質膜和細胞內部結構密切相關,因為這些生物學參數又和細胞對光線的反射、折射等光學特有關。未遭受任何損壞的細胞對光線都具有特征的散射,因此可利用不同的散射光信號對不經染色活細胞進行分析和分選。經過固定的和染色處理的細胞由于光學質的改變,其散射光信號當然不同于活細胞。散射光不僅與作為散射中心的細胞的參數相關,還跟散射角、及收集散射光線的立體角等非生物因素有關。

              流式細胞儀怎么操作?

              ①打開電源,對系統進行預熱;

              ②打開氣體閾,調節 壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統;

              ③在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統;

              ④利用校準標準樣品,調整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的基礎上,0和90散射的熒光強度最強,并要求變異系數為最小;

              ⑤選定流速、測量細胞數、測量參數等,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機屏上數據的顯示方式,從而能直觀掌握測量進程;

              ⑥樣品測量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統;

              ⑦因為實驗數據已存入計算機硬盤(有的機器還備有光盤系統,存貯量更大),因此可關閉氣體、測量裝置,而單獨使用計算機進行數據處理;

              ⑧將所需結果打印出來。

              責任編輯:

              標簽: 流式細胞儀原理是什么 流式細胞儀怎么

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